磁珠的参数和指标见Table 1,产品规格见 Table 2,溶液配方见Table 3。
Table 1 :rProtein A Magnetic Beads 参数和性能指标
磁珠密度
0.95-1.05 g/mL纯磁珠
磁珠浓度
380-580个/mg纯磁珠
磁响应速度
≤ 45 s
粒径
20-80um
ATPA偶联方式
环氧基偶联
载量
hIgG≥40 mg/ml(100%磁珠)
保存缓冲液
20%乙醇
保存温度
2-8℃
Table 2 :试剂和规格
产品名称
试剂名称
规格
数量
保存条件
ATPA Magnetic Beads
10% v/v磁珠
10ml
1
2-8℃
10% v/v磁珠
50ml
1
2-8℃
使用须知
本产品须与磁性分离设备配套使用
磁珠使用前要混合震荡均匀
磁珠预处理要充分
孵育时要保持磁珠处于悬浮状态,以保持最大结合效率
在使用及保存磁珠过程中,禁止磁珠长时间干燥
禁止冷冻,离心磁珠,防止对磁珠产生不可逆的损伤
建议磁珠仅重复纯化同种蛋白
应避免磁珠因磁吸不完全导致的磁珠损耗
用后及时再生,避免将磁珠长时间置于低pH的缓冲液中,避免磁珠长菌
使用方法
Ø 样品预处理(以纯化1ml小鼠腹水为例)
用Wash Buffer将小鼠腹水稀释3-5倍。(细胞培养上清可使用Wash Buffer调节pH至7.0-8.0。)
Ø 磁珠预处理
颠倒混匀磁珠,吸取2mL 10%(v/v)磁珠于准备好的5ml EP管内,磁分离架收集磁珠并丢弃上清液;
加入1.8ml的Wash Buffer,磁分离架收集磁珠并丢弃上清液,重复2次;
如有控内毒的需要,请做下面两个步骤:
加入1.8 ml 0.1M NaOH(Cleaning Buffer)孵育 15 分钟 。然后使用磁分离架收集磁珠并丢弃上清液,重复此步骤1次。
加入1.8ml的Wash Buffer,颠倒混匀1min, 磁分离架收集磁珠并丢弃上清液 ,重复2次。
Ø 结合
将1ml小鼠腹水(pH7.0-8.0)用Wash Buffer稀释3倍至4ml,加入至装有磁珠的EP管中,颠倒混匀,室温缓慢旋转孵育1h(具体时间可根据结合效果调整)。
Ø 洗涤
将装有磁珠跟样本的EP管放置在磁力架上,静置1min,吸弃上清,加入1.8ml Wash Buffer,颠倒混匀1min,静置在磁力架1min,吸弃上清;
重复5次。
Ø 洗脱
加入3-5倍磁珠体积的Elution Buffer(600ul),室温缓慢旋转洗脱5min;
静置在磁力架上,吸走上清,得到洗脱1;
再加入3-5倍磁珠体积的Elution Buffer(600ul),室温缓慢旋转洗脱5min;
静置在磁力架上,吸走上清,得到洗脱2;
向洗脱的上清中加入1/10 Elution Buffer体积的Neutralization Buffer(60ul)。
分别测洗脱1和洗脱2的浓度,根据需要的抗体浓度决定是否混合。
Ø 磁珠再生 (以再生2ml 10%v/v磁珠为例)
(1)将磁珠置于磁力架上,吸弃上清,向EP管内加入与1.8ml Elution Buffer,室温缓慢旋转5min,静置在磁力架上,吸弃上清;
(2)向EP管内加入与1.8ml的Cleaning Buffer ,室温缓慢旋转15min,静置在磁力架上,吸弃上清,重复此步骤1次;
(3)向EP管内加入与1.8ml的Wash Buffer ,室温缓慢旋转2min,静置在磁力架上,吸弃上清,重复一次;
(4)向EP管内加入1.8ml 20%乙醇,使磁珠的浓度保持在10% (v/v) ,4℃保存。
订购信息
产品名称
规格
货号
rProtein A Magnetic Beads
10ml, 10%(v/v)
MG101
rProtein A Magnetic Beads
50ml, 10%(v/v)
MG102
rProtein G Magnetic Beads
10ml, 10%(v/v)
MG201
rProtein G Magnetic Beads
50ml, 10%(v/v)
MG202
Ni NTA Magnetic Beads
10ml, 10%(v/v)
MG301
Ni NTA Magnetic Beads
50ml, 10%(v/v)
MG302
Ni TED Magnetic Beads
10ml, 10%(v/v)
MG401
Ni TED Magnetic Beads
50ml, 10%(v/v)
MG402
ATPA Magnetic Beads
10ml, 10%(v/v)
MG501
ATPA Magnetic Beads
50ml, 10%(v/v)
MG502