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Sumo 蛋白酶(ULP1)
    发布时间: 2024-02-21 14:51    

SUMO 蛋白酶也被称为 Ulp1,是酿酒酵母中ULP1(Ubl特异性蛋白酶1)的重组片段,为一种高活性半胱氨酸蛋白酶。与普通蛋白酶识别一级结构氨基酸序列不同,SUMO蛋白酶识别泛素样蛋白SUMO的三级结构,可以高度特异性地将重组融合蛋白中的 SUMO标签切除。SUMO 蛋白酶在很宽的温度(4℃~30℃)和pH(pH 7.0~9.0)范围内都具有活性,其中最佳催化温度为30℃。本产品为大肠杆菌表达的重组SUMO 蛋白酶,带有 His 标签,在融合蛋白切割后,可利用镍柱亲和层析轻松将其去除。

使用方法

1. 直接将蛋白酶添加到纯化好的待切割蛋白溶液中,推荐使用比例:1mg待切割蛋白添加20 U Ulp1;推荐反应条件:4℃,过夜酶切;

2. 用户可以根据所研究的蛋白探索使用条件,可以在30℃,固定酶添加量20 U/mg,探究酶切时间1-6 h;或在4℃,固定过夜酶切时间,探究酶添加量10-40 U/mg;

3. 反应完成后,可取少量酶切产物进行 SDS-PAGE 分析,酶切后体系中的 SUMO 蛋白酶可通过IMAC树脂亲和层析去除。

注意事项

1. 为达到最好的酶切效果,请保证样本为部分或完全纯化的蛋白;

2. 反应体系中咪唑的浓度应低于 150 mM,否则 SUMO 蛋白酶的活性会受到抑制;

3. SUMO 蛋白酶的理想反应液中 NaCl 的浓度为 150mM。不过根据实际情况,可在 100mM~300mM 之间调节 NaCl 的浓度以达到最佳的效果;

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;

5. 本产品仅限科研使用。

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