知禾同创自主研发Cryo-SFI无血清细胞冻存液，具有独特配方，适用于各种动物细胞株（肿瘤细胞和常规细胞）。该冻存液配方成分明确，无血清，无动物源蛋白，有效避免病毒和支原体污染，保证冻存细胞的安全。

产品应用：

适用于冻存：293细胞、CHO细胞、杂交瘤细胞、干细胞、免疫细胞、肿瘤细胞和组织

产品优势：省时、高效、方便、快捷

1.无血清，细胞可悬浮培养，产品配方明确，无动物源性污染；

2.兼容-80℃和液氮冻存；

3.快速冻存，无需梯度降温；

4.高通量、微量冻存：96孔板、48孔板冻存

产品质量：冻存周期长，细胞存活率高（>95%）

产品保存：

1.质量保障期从产品的生产日期起，为期1年。

2.短期保存于2-8℃，长期保存于-20℃。

3.为避免反复冻融影响产品性能，大包装产品推荐分装后，存放于-20℃备用。

使用方法：

Ⅰ. 常规细胞冷冻保存方法【细胞冻存管法】

选择冻存处于对数生长期的细胞有助于提高复苏细胞存活率。

1. 按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞，置于离心管中，细胞计数。

2. 离心收集培养细胞（参考离心条件：1,000~2,000 rpm，RT, 3~5 min）。

3. 于离心管中加入适量的无血清细胞冻存液，使细胞浓度为5×105至5×106 cells/ml。缓慢地混合均匀，制成细胞混合液。

4. 将细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。

5. 直接将含细胞混合液的冻存管放入-80℃冰箱，长期冷冻保存。

6. 若研究者需要液氮保存时，可将完全冻结的冻存管（放入-80℃冰箱后至少一昼夜）移至-196℃液氮罐。

Ⅱ. 冻存细胞复苏方法【细胞冻存管法】

1. 从冰箱里取出细胞冷冻保存管，立即放入37℃振动水浴槽中快速解冻。

2. 待细胞混合液完全融化后，立即加入1 ml细胞培养基与细胞混合，再将细胞混合液移入含有4倍体积细3. 胞培养基的离心管中，混合均匀。

4. 离心收集培养细胞（参考离心条件：1,000~2,000 rpm，RT, 3~5 min），充分弃除离心上清。

5. 加入适量的新鲜细胞培养基，进行混合和稀释。

6. 镜检后，研究者可根据各自方法和需要，调整细胞密度，进行细胞培养。

Ⅲ. 原位冻存法【孔板冻存法】

（1）对于贴壁细胞：

1. 孔板中细胞生长状态良好且汇合度达到50%以上时，从细胞培养板中将培养基上清小心吸取干净。

2. 加入适量（体积根据孔板定，一般96孔板加100ul, 48孔板加200 ul）无血清细胞冻存液于培养孔板中，充分浸润细胞。

3. 盖上盖板，做好密封措施，防止染菌。

4. 直接将含冻存液的细胞培养板放入-80℃冰箱，长期冷冻保存。

（2）对于悬浮细胞：

1. 孔板中细胞生长状态良好且密度达到5×105至5×106cells/ml时，用水平离心机离心（参考离心条件：1,000~2,000rpm，RT, 3~5 min），从细胞培养板中将培养基上清小心吸取干净。

2. 加入适量（体积根据孔板定，一般96孔板加100ul, 48孔板加200 ul）无血清细胞冻存液于培养孔板中，充分浸润细胞。

3. 盖上盖板，做好密封措施，防止染菌。

4. 直接将含冻存液的细胞培养板放入-80℃冰箱，长期冷冻保存。

Ⅳ. 原位冻存复苏方法【孔板冻存法】

（1）对于贴壁细胞：

1. 从冰箱里取出冷冻的细胞培养板，立即放入37℃培养箱中解冻。

2. 待细胞冻存液完全融化后，将液体小心吸取干净，立即加入适量细胞培养基。

3. 置37℃，5%CO2培养箱常规传代培养。

（2）对于悬浮细胞：

1. 从冰箱里取出冷冻的细胞培养板，立即放入37℃培养箱中解冻。

2. 待细胞冻存液完全融化后，用水平离心机离心（参考离心条件：1,000~2,000rpm，RT, 3~5 min），将液体小心吸取干净，立即加入适量细胞培养基重悬细胞。

3. 置37℃，5%CO2培养箱常规传代培养。