胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶,能特异性切割赖氨酸和精氨酸羧基末端的肽键,这一特性使其能够有效降解细胞间结合蛋白。本产品以重组胰蛋白酶为主要原料,通过无菌过滤配制而成的细胞消化液,产品中不使用任何含动物源的原料,产品受外源病毒污染的风险极低,具有极高的生物安全性,可替代猪胰腺来源胰蛋白酶应用于细胞和组织的消化等用途。
1. 干细胞、原代细胞传代过程中的消化;
2. 疫苗生产过程中宿主细胞的消化;
3. 重组蛋白的生产过程中贴壁CHO细胞的消化。
1. 准备工作:吸除培养液,使用无菌PBS、Hanks液或无血清培养液轻柔洗涤细胞一次,去除残余血清。
2. 添加消化液:加入适量重组胰蛋白酶消化液(液量需刚覆盖细胞层),室温或37℃下静置30秒至5分钟(具体时间依细胞类型调整)。
3. 观察消化程度:显微镜下观察细胞回缩、间隙增大,或轻拍培养器皿见细胞滑落,即为消化终点。此时迅速吸除消化液。
4. 终止消化:加入含血清的完全培养基,轻柔吹打细胞至完全悬浮,即可进行后续传代或实验。
5. 特殊情况处理:
消化不足:补加少量消化液,延长作用时间。
消化过度:若细胞已自行脱落,收集细胞悬液,离心后去除上清,用新鲜培养基重悬即可。
无动物源性:重组表达工艺全程无动物源原料,杜绝外源病毒、支原体等污染风险,符合药典对生物制品原料的质量要求。
消化性能好:胰蛋白酶纯度高,避免了杂质对细胞生长的影响。比传统胰酶消化液具有更大的特异性,作用更温和, 已证明能够分离在无血清和血清补充系统中培养的细胞。
低内毒素,无细菌、真菌、支原体、噬菌体等污染。
由于组织或细胞性质不同,实验人员应依据具体情况,确定最佳消化时间。
消化过程中需注意细胞状态,消化细胞时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁和生长状态。
本产品不建议直接置于37℃预温,否则胰酶的活力会有一定的损失。
严格按说明书要求-5 ~ -20℃保存,避免反复冻融,小量使用时建议分装,2-8℃可保存2周。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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