胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶,能特异性切割赖氨酸和精氨酸羧基末端的肽键,这一特性使其能够有效降解细胞间结合蛋白。本产品采用重组DNA技术在毕赤酵母中表达生产,其氨基酸序列与猪胰腺来源的胰蛋白酶完全一致,确保了与天然酶相同的酶学性质和水解特异性,可替代猪胰腺来源胰蛋白酶应用于细胞和组织的消化等用途。
本品具有明确的反应条件,最适pH范围为7.0-11.0。其酶活性会受到丝氨酸蛋白酶抑制剂(如PMSF、TLCK)、抑肽酶以及金属离子螯合剂(如EDTA)的影响。
与传统动物源产品相比,本品最大的优势在于通过重组技术实现了高纯度、高比活性,并彻底避免了动物源病原体的污染风险,为生物制药、细胞培养等应用提供了更安全、质量更稳定的选择。
表达宿主
毕赤酵母
性状
白色或类白色冻干粉
分子量
24 kDa
纯度
≥95%
活性
≥2500U/mg
比活性
≥3800U/mg
保存条件
-20℃~-80℃ 避光保存
微生物限度
符合规定
内毒素
≤10 EU/mg
宿主DNA残留
≤10ng/mg
宿主蛋白残留
最佳pH
7.0~9.0
溶解性
在水或缓冲液中可溶
细胞培养:疫苗生产;贴壁细胞的细胞消化;干细胞温和消化等
重组蛋白:重组蛋白生产;蛋白质分析
溶液配制:重组胰蛋白酶室温下融化,取适量胰蛋白酶,加入HBSS平衡液(或其他适宜细胞消化的缓冲液,如需要加入EDTA其终浓度推荐0-1mM,最好不超过2mM),推荐一般使用的胰蛋白酶浓度约为0.1-0.3mg/ml(浓度根据不同细胞进行调整),轻柔混匀;该步骤可在室温环境操作。
使用0.22μm滤膜对上述胰蛋白酶溶液过滤并转移至无菌容器中;该步骤可在室温环境操作;
过滤后的胰蛋白酶溶液应在当天按照要求直接使用(例如加入1ml至T25瓶,37℃消化细胞)。
运输稳定性:冰袋保温运输,活性稳定。
储存稳定性:冻干粉在-15℃及以下条件下至少能稳定存放24个月。1mM盐酸或50mM醋酸溶解后储存于-15℃及以下,反复冻融10次,无活性损失。溶解后 2~8℃保存建议不超过 7天 ,溶解后-15℃ 及以下保存建议不超过 30天 。
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