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  • MG501 MG502重组耐碱蛋白A磁珠 (ATPA Magnetic Beads)
    MG501 MG502重组耐碱蛋白A磁珠 (ATPA Magnetic Beads)
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  • MG501 MG502重组耐碱蛋白A磁珠 (ATPA Magnetic Beads)

    耐碱蛋白A磁珠(ATPA Magnetic Beads) 本产品将重组耐碱蛋白A (Recombinant Alkali-Tolerant Protein A)高密度环氧基偶联到磁性琼脂糖微球表面,具有高载量,高特异性,高回收率,低非特异吸附和强耐碱性的特性。可结合293/CHO细胞培养上清、杂交瘤细胞上清、小鼠腹水和血清等样本中的IgG或带有FC标签的重组蛋白。重组ATPA只保留了Protein A中抗体特异结合的部分结构域,与Protein A相比,对样品的纯化效果几乎不变,但对碱的耐受性大大提升,在重复使用时,极大地降低了样品交叉污染的风险。

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商品参数
    产品简介

    耐碱蛋白A磁珠(ATPA Magnetic Beads) 本产品将重组耐碱蛋白A (Recombinant Alkali-Tolerant Protein A)高密度环氧基偶联到磁性琼脂糖微球表面,具有高载量,高特异性,高回收率,低非特异吸附和强耐碱性的特性。可结合293/CHO细胞培养上清、杂交瘤细胞上清、小鼠腹水和血清等样本中的IgG或带有FC标签的重组蛋白。重组ATPA只保留了Protein A中抗体特异结合的部分结构域,与Protein A相比,对样品的纯化效果几乎不变,但对碱的耐受性大大提升,在重复使用时,极大地降低了样品交叉污染的风险。




    磁珠的参数和指标见Table 1,产品规格见 Table 2,溶液配方见Table 3。


    Table 1:参数和性能指标

     

    磁珠密度

    0.95-1.05 g/mL纯磁珠

    磁珠浓度

    380-580个/mg纯磁珠

    磁响应速度

    ≤ 45 s

    粒径

    20-80um

    ATPA偶联方式

    环氧基偶联

    载量

    hIgG≥40 mg/ml(100%磁珠)

    保存缓冲液

    20%乙醇

    保存温度

    2-8℃


    Table 2:试剂和规格

     

    产品名称

    试剂名称

    规格

    数量

    保存条件

    ATPA Magnetic   Beads

    10% v/v磁珠

    10ml

    1

    2-8℃

    10% v/v磁珠

    50ml

    1

    2-8℃

    使用须知

    本产品须与磁性分离设备配套使用

    磁珠使用前要混合震荡均匀

    磁珠预处理要充分

    孵育时要保持磁珠处于悬浮状态,以保持最大结合效率

    在使用及保存磁珠过程中,禁止磁珠长时间干燥

    禁止冷冻,离心磁珠,防止对磁珠产生不可逆的损伤

    建议磁珠仅重复纯化同种蛋白

    应避免磁珠因磁吸不完全导致的磁珠损耗

    用后及时再生,避免将磁珠长时间置于低pH的缓冲液中,避免磁珠长菌



    使用方法


    样品预处理

    (以纯化1ml小鼠腹水为例)

    用Wash Buffer将小鼠腹水稀释3-5倍。(细胞培养上清可使用Wash Buffer调节pH至7.0-8.0。)

    磁珠预处理

    颠倒混匀磁珠,吸取2mL 10%(v/v)磁珠于准备好的5ml EP管内,磁分离架收集磁珠并丢弃上清液;

    加入1.8ml的Wash Buffer,磁分离架收集磁珠并丢弃上清液,重复2次;

    如有控内毒的需要,请做下面两个步骤:

    加入1.8 ml 0.1M NaOH(Cleaning Buffer)孵育 15 分钟。然后使用磁分离架收集磁珠并丢弃上清液,重复此步骤1次。

    加入1.8ml的Wash Buffer,颠倒混匀1min,磁分离架收集磁珠并丢弃上清液,重复2次。

    结合

    将1ml小鼠腹水(pH7.0-8.0)用Wash Buffer稀释3倍至4ml,加入至装有磁珠的EP管中,颠倒混匀,室温缓慢旋转孵育1h(具体时间可根据结合效果调整)。

    洗涤

    将装有磁珠跟样本的EP管放置在磁力架上,静置1min,吸弃上清,加入1.8ml Wash Buffer,颠倒混匀1min,静置在磁力架1min,吸弃上清;

    重复5次。

    洗脱

    加入3-5倍磁珠体积的Elution Buffer(600ul),室温缓慢旋转洗脱5min;

    静置在磁力架上,吸走上清,得到洗脱1;

    再加入3-5倍磁珠体积的Elution Buffer(600ul),室温缓慢旋转洗脱5min;

    静置在磁力架上,吸走上清,得到洗脱2;

    向洗脱的上清中加入1/10 Elution Buffer体积的Neutralization Buffer(60ul)。

    分别测洗脱1和洗脱2的浓度,根据需要的抗体浓度决定是否混合。

    磁珠再生

    (以再生2ml 10%v/v磁珠为例)

    (1)将磁珠置于磁力架上,吸弃上清,向EP管内加入与1.8ml Elution Buffer,室温缓慢旋转5min,静置在磁力架上,吸弃上清;

    (2)向EP管内加入与1.8ml的Cleaning Buffer,室温缓慢旋转15min,静置在磁力架上,吸弃上清,重复此步骤1次;

    (3)向EP管内加入与1.8ml的Wash Buffer,室温缓慢旋转2min,静置在磁力架上,吸弃上清,重复一次;

    (4)向EP管内加入1.8ml 20%乙醇,使磁珠的浓度保持在10% (v/v) ,4℃保存。




    订购信息



    产品名称

    规格

    货号

    rProtein A Magnetic Beads

    10ml, 10%(v/v)

    MG101

    rProtein A Magnetic Beads

    50ml, 10%(v/v)

    MG102

    rProtein G Magnetic Beads

    10ml, 10%(v/v)

    MG201

    rProtein G Magnetic Beads

    50ml, 10%(v/v)

    MG202

    Ni NTA Magnetic Beads

    10ml, 10%(v/v)

    MG301

    Ni NTA Magnetic Beads

    50ml, 10%(v/v)

    MG302

    Ni TED  Magnetic Beads

    10ml, 10%(v/v)

    MG401

    Ni TED  Magnetic Beads

    50ml, 10%(v/v)

    MG402

    ATPA Magnetic Beads

    10ml, 10%(v/v)

    MG501

    ATPA Magnetic Beads

    50ml, 10%(v/v)

    MG502




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