背景信息
重组蛋白G磁珠（rProtein G Magnetic Beads）本产品将重组Protein G高密度氨基偶联到磁性琼脂糖微球表面，具有高载量，高特异性，高回收率和低非特异吸附的特性。可结合293/CHO细胞培养上清、杂交瘤细胞上清、小鼠腹水和血清等样本中的IgG或带有FC标签的重组蛋白。重组Protein G只保留了C1，C2和C3三个抗体特异结合的结构域，降低了非特异性吸附，因此通过一步结合和洗脱即可得到纯度大于90%的目的蛋白。Protein G可用于纯化不能与Protein A很好结合的哺乳动物IgG。相对于Protein A，Protein G对于大多数哺乳动物的IgG有着更高的亲和力，尤其是对于人 IgG3，小鼠IgG1和大鼠 IgG2a。Protein A和Protein G与不同来源及亚类的免疫球蛋白结合能力不一样，具体可根据目标抗体的种属来源及亚型选择磁珠的类别。
技术指标
Table 1：rProtein G Magnetic Beads 参数和性能指标
磁珠密度 | 0.95-1.05 g/mL纯磁珠 |
磁珠浓度 | 380-580个/mg纯磁珠 |
磁响应速度 | ≤ 45 s |
粒径 | 20-80um |
偶联方式 | 氨基偶联 |
载量 | hIgG≥50 mg/ml（100%磁珠） |
保存缓冲液 | 20%乙醇 |
保存温度 | 2-8℃ |
Table 2：试剂和规格
产品名称 | 试剂名称 | 规格 | 数量 | 保存条件 |
rProtein G Magnetic Beads | 10% v/v磁珠 | 10ml | 1 | 2-8℃ |
10% v/v磁珠 | 50ml | 1 | 2-8℃ |
使用须知
使用方法
样品预处理
（以纯化1ml小鼠腹水为例，目标抗体约1-2mg）
用Wash Buffer将小鼠腹水稀释3-5倍。（杂交瘤细胞培养上清可使用Wash Buffer调节pH至7.0-8.0。）
磁珠预处理
颠倒混匀磁珠，吸取2mL 10%（v/v）磁珠于准备好的5ml EP管内，
放置在磁力架上，静置1min，吸弃上清；
加入与10%磁珠等体积的Wash Buffer 2ml（这里的等体积是指磁珠加保存液的总体积），取下EP管，颠倒混匀1min；
放置在磁力架上，静置1min，吸弃上清；
重复1次。
纯化过程
结合
将1ml小鼠腹水（pH7.0-8.0）用Wash Buffer稀释3倍至4ml，加入至装有磁珠的EP管中，颠倒混匀，室温缓慢旋转孵育1h（具体时间可根据结合效果调整）。
洗涤
将装有磁珠跟样本的EP管放置在磁力架上，静置1min，吸弃上清，加入与磁珠等体积的Wash Buffer（2ml），颠倒混匀1min，静置在磁力架1min，吸弃上清；
重复5次。
洗脱
加入3-5倍磁珠体积（2ml 10% v/v磁珠的磁珠体积是200ul）的Elution Buffer（600ul），室温缓慢旋转洗脱10min；
静置在磁力架上，吸走上清，得到洗脱1；
再加入3-5倍磁珠体积（2ml 10% v/v磁珠的磁珠体积是200ul）的Elution Buffer（600ul），室温缓慢旋转洗脱10min；
静置在磁力架上，吸走上清，得到洗脱2；
向洗脱的上清中加入1/10 Elution Buffer体积的Neutralization Buffer（60ul）。
分别测洗脱1和洗脱2的浓度，根据需要的抗体浓度决定是否混合。
磁珠再生
（以再生2ml 10%v/v磁珠为例）
（1）将磁珠置于磁力架上，吸弃上清，向EP管内加入与10%磁珠等体积的Elution Buffer（2ml），室温缓慢旋转5min，静置在磁力架上，吸弃上清；
（2）向EP管内加入与10%磁珠等体积的Wash Buffer（2ml），再加入1%（v/v）TritionX-100，室温缓慢旋转10min，静置在磁力架上，吸弃上清；
（3）向EP管内加入与10%磁珠等体积的Wash Buffer（2ml），室温缓慢旋转2min，静置在磁力架上，吸弃上清，重复一次；
（4）向EP管内加入1.8ml 20%乙醇，使磁珠的浓度保持在10% (v/v) ，4℃保存。
运输与储存
冰袋运输。
产品应于 2–8℃ 条件下避光、密闭保存。不可冷冻，冷冻将导致磁珠聚集、性能下降。使用前充分混匀至均一状态。
应用领域
重组蛋白G（Protein G）源于Group G链球菌表面蛋白，通过重组表达去除白蛋白结合域，保留IgG Fc特异性结合域。蛋白G识别Fc段的CH2-CH3界面，与蛋白A的识别位点部分重叠但物种偏好互补。广泛应用于：
单克隆及多克隆抗体纯化
小鼠IgG1及大鼠IgG纯化
免疫沉淀（IP）与免疫共沉淀（Co-IP）
杂交瘤上清快速筛选
噬菌体/酵母展示抗体库筛选
抗体-抗原相互作用分析
蛋白A与蛋白G磁珠互补：蛋白A对人/兔IgG载量高且耐碱CIP，蛋白G对小鼠IgG1、大鼠、山羊等多物种结合谱更宽。两者结合使用覆盖绝大多数常用物种及IgG亚类。
产品优势
重组表达，无动物源成分
广谱结合，覆盖蛋白A弱结合物种/亚类
操作便捷，无需离心/重力柱
兼容高通量自动化纯化
非特异性吸附本底低
订购信息
产品名称 | 规格 | 货号 |
rProtein A Magnetic Beads | 10ml, 10%(v/v) | MG101 |
rProtein A Magnetic Beads | 50ml, 10%(v/v) | MG102 |
rProtein G Magnetic Beads | 10ml, 10%(v/v) | MG201 |
rProtein G Magnetic Beads | 50ml, 10%(v/v) | MG202 |
Ni NTA Magnetic Beads | 10ml, 10%(v/v) | MG301 |
Ni NTA Magnetic Beads | 50ml, 10%(v/v) | MG302 |
Ni TED Magnetic Beads | 10ml, 10%(v/v) | MG401 |
Ni TED Magnetic Beads | 50ml, 10%(v/v) | MG402 |
