背景信息
耐碱蛋白A磁珠（ATPA Magnetic Beads） 本产品将重组耐碱蛋白A (Recombinant Alkali-Tolerant Protein A)高密度环氧基偶联到磁性琼脂糖微球表面，具有高载量，高特异性，高回收率，低非特异吸附和强耐碱性的特性。可结合293/CHO细胞培养上清、杂交瘤细胞上清、小鼠腹水和血清等样本中的IgG或带有FC标签的重组蛋白。重组ATPA只保留了Protein A中抗体特异结合的部分结构域，与Protein A相比，对样品的纯化效果几乎不变，但对碱的耐受性大大提升，在重复使用时，极大地降低了样品交叉污染的风险。
技术指标
磁珠的参数和指标见Table 1，产品规格见 Table 2，溶液配方见Table 3。
Table 1：参数和性能指标
磁珠密度 | 0.95-1.05 g/mL纯磁珠 |
磁珠浓度 | 380-580个/mg纯磁珠 |
磁响应速度 | ≤ 45 s |
粒径 | 20-80um |
ATPA偶联方式 | 环氧基偶联 |
载量 | hIgG≥40 mg/ml（100%磁珠） |
保存缓冲液 | 20%乙醇 |
保存温度 | 2-8℃ |
Table 2：试剂和规格
产品名称 | 试剂名称 | 规格 | 数量 | 保存条件 |
ATPA Magnetic Beads | 10% v/v磁珠 | 10ml | 1 | 2-8℃ |
10% v/v磁珠 | 50ml | 1 | 2-8℃ |
使用须知
使用方法
样品预处理
（以纯化1ml小鼠腹水为例）
用Wash Buffer将小鼠腹水稀释3-5倍。（细胞培养上清可使用Wash Buffer调节pH至7.0-8.0。）
磁珠预处理
颠倒混匀磁珠，吸取2mL 10%（v/v）磁珠于准备好的5ml EP管内，磁分离架收集磁珠并丢弃上清液；
加入1.8ml的Wash Buffer，磁分离架收集磁珠并丢弃上清液，重复2次；
如有控内毒的需要，请做下面两个步骤：
加入1.8 ml 0.1M NaOH（Cleaning Buffer）孵育 15 分钟。然后使用磁分离架收集磁珠并丢弃上清液，重复此步骤1次。
加入1.8ml的Wash Buffer，颠倒混匀1min，磁分离架收集磁珠并丢弃上清液，重复2次。
结合
将1ml小鼠腹水（pH7.0-8.0）用Wash Buffer稀释3倍至4ml，加入至装有磁珠的EP管中，颠倒混匀，室温缓慢旋转孵育1h（具体时间可根据结合效果调整）。
洗涤
将装有磁珠跟样本的EP管放置在磁力架上，静置1min，吸弃上清，加入1.8ml Wash Buffer，颠倒混匀1min，静置在磁力架1min，吸弃上清；
重复5次。
洗脱
加入3-5倍磁珠体积的Elution Buffer（600ul），室温缓慢旋转洗脱5min；
静置在磁力架上，吸走上清，得到洗脱1；
再加入3-5倍磁珠体积的Elution Buffer（600ul），室温缓慢旋转洗脱5min；
静置在磁力架上，吸走上清，得到洗脱2；
向洗脱的上清中加入1/10 Elution Buffer体积的Neutralization Buffer（60ul）。
分别测洗脱1和洗脱2的浓度，根据需要的抗体浓度决定是否混合。
磁珠再生
（以再生2ml 10%v/v磁珠为例）
（1）将磁珠置于磁力架上，吸弃上清，向EP管内加入与1.8ml Elution Buffer，室温缓慢旋转5min，静置在磁力架上，吸弃上清；
（2）向EP管内加入与1.8ml的Cleaning Buffer，室温缓慢旋转15min，静置在磁力架上，吸弃上清，重复此步骤1次;
（3）向EP管内加入与1.8ml的Wash Buffer，室温缓慢旋转2min，静置在磁力架上，吸弃上清，重复一次；
（4）向EP管内加入1.8ml 20%乙醇，使磁珠的浓度保持在10% (v/v) ，4℃保存。
运输与储存
冰袋运输。
产品应于 2–8℃ 条件下避光、密闭保存。不可冷冻，冷冻将导致磁珠聚集、性能下降。使用前充分混匀至均一状态。
应用领域
重组耐碱蛋白A磁珠（ATPA）将耐碱工程化蛋白A配基与磁性微球共价偶联，保留蛋白A对IgG Fc段的高亲和力（Kd ~10⁻⁸ M），同时通过定向突变增强碱耐受性。传统蛋白A在0.1 M NaOH中结合载量快速衰减，ATPA可耐受0.1–0.5 M NaOH反复清洗再生，延长介质使用寿命。
广泛应用于：
单克隆抗体（mAb）纯化
双特异性抗体纯化
Fc融合蛋白纯化
抗体药物偶联物（ADC）纯化
GMP/IND级抗体工艺开发
高通量抗体筛选与纯化
生物类似药工艺开发
耐碱特性使ATPA磁珠可反复使用，显著降低单周期纯化成本，同时碱洗有效去除内毒素、宿主蛋白及病毒等残留污染物。磁珠体系兼容自动化工作站，适合中高通量抗体纯化及早期工艺开发筛选。
产品优势
订购信息
产品名称 | 规格 | 货号 |
rProtein A Magnetic Beads | 10ml, 10%(v/v) | MG101 |
rProtein A Magnetic Beads | 50ml, 10%(v/v) | MG102 |
rProtein G Magnetic Beads | 10ml, 10%(v/v) | MG201 |
rProtein G Magnetic Beads | 50ml, 10%(v/v) | MG202 |
Ni NTA Magnetic Beads | 10ml, 10%(v/v) | MG301 |
Ni NTA Magnetic Beads | 50ml, 10%(v/v) | MG302 |
Ni TED Magnetic Beads | 10ml, 10%(v/v) | MG401 |
Ni TED Magnetic Beads | 50ml, 10%(v/v) | MG402 |
ATPA Magnetic Beads | 10ml, 10%(v/v) | MG501 |
ATPA Magnetic Beads | 50ml, 10%(v/v) | MG502 |
