耐碱蛋白A磁珠(ATPA Magnetic Beads) 本产品将重组耐碱蛋白A (Recombinant Alkali-Tolerant Protein A)高密度环氧基偶联到磁性琼脂糖微球表面,具有高载量,高特异性,高回收率,低非特异吸附和强耐碱性的特性。可结合293/CHO细胞培养上清、杂交瘤细胞上清、小鼠腹水和血清等样本中的IgG或带有FC标签的重组蛋白。重组ATPA只保留了Protein A中抗体特异结合的部分结构域,与Protein A相比,对样品的纯化效果几乎不变,但对碱的耐受性大大提升,在重复使用时,极大地降低了样品交叉污染的风险。
磁珠的参数和指标见Table 1,产品规格见 Table 2,溶液配方见Table 3。
磁珠密度 | 0.95-1.05 g/mL纯磁珠 |
磁珠浓度 | 380-580个/mg纯磁珠 |
磁响应速度 | ≤ 45 s |
粒径 | 20-80um |
ATPA偶联方式 | 环氧基偶联 |
载量 | hIgG≥40 mg/ml(100%磁珠) |
保存缓冲液 | 20%乙醇 |
保存温度 | 2-8℃ |
产品名称 | 试剂名称 | 规格 | 数量 | 保存条件 |
ATPA Magnetic Beads | 10% v/v磁珠 | 10ml | 1 | 2-8℃ |
10% v/v磁珠 | 50ml | 1 | 2-8℃ |
本产品须与磁性分离设备配套使用
磁珠使用前要混合震荡均匀
磁珠预处理要充分
孵育时要保持磁珠处于悬浮状态,以保持最大结合效率
在使用及保存磁珠过程中,禁止磁珠长时间干燥
禁止冷冻,离心磁珠,防止对磁珠产生不可逆的损伤
建议磁珠仅重复纯化同种蛋白
应避免磁珠因磁吸不完全导致的磁珠损耗
用后及时再生,避免将磁珠长时间置于低pH的缓冲液中,避免磁珠长菌
(以纯化1ml小鼠腹水为例)
用Wash Buffer将小鼠腹水稀释3-5倍。(细胞培养上清可使用Wash Buffer调节pH至7.0-8.0。)
颠倒混匀磁珠,吸取2mL 10%(v/v)磁珠于准备好的5ml EP管内,磁分离架收集磁珠并丢弃上清液;
加入1.8ml的Wash Buffer,磁分离架收集磁珠并丢弃上清液,重复2次;
如有控内毒的需要,请做下面两个步骤:
加入1.8 ml 0.1M NaOH(Cleaning Buffer)孵育 15 分钟。然后使用磁分离架收集磁珠并丢弃上清液,重复此步骤1次。
加入1.8ml的Wash Buffer,颠倒混匀1min,磁分离架收集磁珠并丢弃上清液,重复2次。
将1ml小鼠腹水(pH7.0-8.0)用Wash Buffer稀释3倍至4ml,加入至装有磁珠的EP管中,颠倒混匀,室温缓慢旋转孵育1h(具体时间可根据结合效果调整)。
将装有磁珠跟样本的EP管放置在磁力架上,静置1min,吸弃上清,加入1.8ml Wash Buffer,颠倒混匀1min,静置在磁力架1min,吸弃上清;
重复5次。
加入3-5倍磁珠体积的Elution Buffer(600ul),室温缓慢旋转洗脱5min;
静置在磁力架上,吸走上清,得到洗脱1;
再加入3-5倍磁珠体积的Elution Buffer(600ul),室温缓慢旋转洗脱5min;
静置在磁力架上,吸走上清,得到洗脱2;
向洗脱的上清中加入1/10 Elution Buffer体积的Neutralization Buffer(60ul)。
分别测洗脱1和洗脱2的浓度,根据需要的抗体浓度决定是否混合。
(以再生2ml 10%v/v磁珠为例)
(1)将磁珠置于磁力架上,吸弃上清,向EP管内加入与1.8ml Elution Buffer,室温缓慢旋转5min,静置在磁力架上,吸弃上清;
(2)向EP管内加入与1.8ml的Cleaning Buffer,室温缓慢旋转15min,静置在磁力架上,吸弃上清,重复此步骤1次;
(3)向EP管内加入与1.8ml的Wash Buffer,室温缓慢旋转2min,静置在磁力架上,吸弃上清,重复一次;
(4)向EP管内加入1.8ml 20%乙醇,使磁珠的浓度保持在10% (v/v) ,4℃保存。
产品名称 | 规格 | 货号 |
rProtein A Magnetic Beads | 10ml, 10%(v/v) | MG101 |
rProtein A Magnetic Beads | 50ml, 10%(v/v) | MG102 |
rProtein G Magnetic Beads | 10ml, 10%(v/v) | MG201 |
rProtein G Magnetic Beads | 50ml, 10%(v/v) | MG202 |
Ni NTA Magnetic Beads | 10ml, 10%(v/v) | MG301 |
Ni NTA Magnetic Beads | 50ml, 10%(v/v) | MG302 |
Ni TED Magnetic Beads | 10ml, 10%(v/v) | MG401 |
Ni TED Magnetic Beads | 50ml, 10%(v/v) | MG402 |
ATPA Magnetic Beads | 10ml, 10%(v/v) | MG501 |
ATPA Magnetic Beads | 50ml, 10%(v/v) | MG502 |




重组蛋白A磁珠(rProtein A Magnetic Beads) 本产品将重组Protein A高密度氨基偶联到磁性琼脂糖微球表面,具有高载量,高特异性,高回收率和低非特异吸附的特性。可结合293/CHO细胞培养上清、杂交瘤细胞上清、小鼠腹水和血清等样本中的IgG或带有FC标签的重组蛋白。重组Protein A只保留了E,D,A,B,C五个抗体特异结合的结构域,降低了非特异性吸附,因此通过一步结合和洗脱即可得到纯度大于90%的目的蛋白。
重组蛋白G磁珠(rProtein G Magnetic Beads)本产品将重组Protein G高密度氨基偶联到磁性琼脂糖微球表面,具有高载量,高特异性,高回收率和低非特异吸附的特性。可结合293/CHO细胞培养上清、杂交瘤细胞上清、小鼠腹水和血清等样本中的IgG或带有FC标签的重组蛋白。重组Protein G只保留了C1,C2和C3三个抗体特异结合的结构域,降低了非特异性吸附,因此通过一步结合和洗脱即可得到纯度大于90%的目的蛋白。Protein G可用于纯化不能与Protein A很好结合的哺乳动物IgG。相对于Protein A,Protein G对于大多数哺乳动物的IgG有着更高的亲和力,尤其是对于人 IgG3,小鼠IgG1和大鼠 IgG2a。
Protein A和Protein G与不同来源及亚类的免疫球蛋白结合能力不一样,具体可根据目标抗体的种属来源及亚型选择磁珠的类别。
Ni NTA Magnetic Beads 琼脂糖磁珠是一种用于纯化带有组氨酸(His)标签蛋白的新工具, 其具有超顺磁性,可通过外加磁场实现快速的分离与回收。本产品的活性基团为螯合有 Ni2+ 的亚硝基三乙酸。 与传统的 Ni-NTA 介质相比,Ni NTA Magnetic Beads 有以下优势:
操作简单且快速,无需对样品进行澄清处理,可以直接从复杂样本中捕获带有组氨酸标签的目标蛋白,极大的简化了纯化工艺;提高了纯化效率,高纯度、高收率;易于平行重复,易于放大。
Ni TED Magnetic Beads 琼脂糖磁珠是一种用于纯化带有组氨酸(His)标签蛋白的新工具, 其具有超顺磁性,可通过外加磁场实现快速的分离与回收。本产品的活性基团为螯合有 Ni2+ 的TED,由于TED对镍离子超强的螯合能力,使亲和Ni-TED能够耐受高浓度的螯合剂EDTA 和还原剂DTT,适用于含有EDTA 或DTT等成分的组氨酸标记(His-Tag)的基因工程蛋白质以的分离纯化。与传统的 Ni-NTA 介质相比,Ni TED Magnetic Beads有以下优势:
操作简单且快速,无需对样品进行澄清处理,可以直接从复杂样本中捕获带有组氨酸标签的目标蛋白,极大的简化了纯化工艺和提高纯化效率
耐受EDTA或DTT等成分,适用于真核表达样品的直接纯化
耐受NaOH,无需脱镍即可清洗,大大缩短了磁珠再生时间
高纯度、高收率
易于平行重复
易于放大
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