背景信息
胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶，能特异性切割赖氨酸和精氨酸羧基末端的肽键，这一特性使其能够有效降解细胞间结合蛋白。本产品采用重组DNA技术在毕赤酵母中表达生产，其氨基酸序列与猪胰腺来源的胰蛋白酶完全一致，确保了与天然酶相同的酶学性质和水解特异性，可替代猪胰腺来源胰蛋白酶应用于细胞和组织的消化等用途。本品具有明确的反应条件，最适pH范围为7.0-11.0。其酶活性会受到丝氨酸蛋白酶抑制剂（如PMSF、TLCK）、抑肽酶以及金属离子螯合剂（如EDTA）的影响。
与传统动物源产品相比，本品最大的优势在于通过重组技术实现了高纯度、高比活性，并彻底避免了动物源病原体的污染风险，为生物制药、细胞培养等应用提供了更安全、质量更稳定的选择。
技术指标
表达宿主 | 毕赤酵母 |
性状 | 白色或类白色冻干粉 |
分子量 | 24 kDa |
纯度 | ≥95% |
活性 | ≥2500U/mg |
比活性 | ≥3800U/mg |
保存条件 | -20℃~-80℃ 避光保存 |
微生物限度 | 符合规定 |
内毒素 | ≤10 EU/mg |
宿主DNA残留 | ≤10ng/mg |
宿主蛋白残留 | ≤10ug/mg |
最佳pH | 7.0~9.0 |
溶解性 | 在水或缓冲液中可溶 |
使用方法
本产品为冻干粉形式。建议使用无菌水或 1 mM HCl 复溶至 1 mg/mL，分装后 -20℃ 保存。
以 PBS（含或不含 EDTA）稀释至 0.25% 或适宜浓度作为工作液。为方便使用，也可选择即用型液体消化液版本 RP1015L。
贴壁细胞消化：弃去培养基后，使用 PBS 润洗细胞一次。加入适量工作液覆盖细胞表面，于 37℃ 孵育至细胞收缩变圆。轻轻拍打培养瓶使细胞脱落，加入等量含血清培养基终止消化。消化时间需根据具体细胞类型进行优化，避免过度消化损伤细胞。
运输与储存
运输稳定性：冰袋保温运输，活性稳定。
储存稳定性：冻干粉在-15℃及以下条件下至少能稳定存放36个月。溶解后 2~8℃保存建议不超过 7天。
应用领域
重组胰酶（Recombinant Trypsin）是细胞培养中应用最广泛的消化酶，特异性切割赖氨酸和精氨酸残基 C 端肽键，实现贴壁细胞从培养表面的温和解离。
广泛应用于：
配制方法
溶液配制：重组胰蛋白酶室温下融化，取适量胰蛋白酶，加入HBSS平衡液（或其他适宜细胞消化的缓冲液，如需要加入EDTA其终浓度推荐0-1mM，最好不超过2mM），推荐一般使用的胰蛋白酶浓度约为100U -300U/ml（浓度根据不同细胞进行调整），轻柔混匀；该步骤可在室温环境操作。
使用0.22μm滤膜对上述胰蛋白酶溶液过滤并转移至无菌容器中；该步骤可在室温环境操作；
过滤后的胰蛋白酶溶液应在当天按照要求直接使用（例如加入1ml至T25瓶，37℃消化细胞）。
重组胰酶vs 传统猪源胰酶
项目 | 知禾重组胰酶 | 传统猪源胰酶 |
安全性 | 无动物源，无猪源病毒/朊病毒风险 | 可能存在猪源病毒污染 |
纯度 | ≥98%（SDS-PAGE + HPLC） | 通常 70–90% |
内毒素 | ≤10 EU/mg | 通常 ≥50 EU/mg |
批间一致性 | 重组表达，高度可控 | 动物组织来源，批次差异大 |
杂酶残留 | 宿主蛋白/DNA 残留可控 | 存在杂蛋白酶残留 |
注意事项
本产品仅供科研、工艺开发及生物制造用途使用，不得用于人体或动物的诊断、治疗或临床应用。
产品开封后建议尽快使用，未使用部分应及时密封并于推荐条件下保存。
复溶及使用过程中应严格遵循无菌操作规范，避免微生物污染。
建议按照单次使用量分装保存，避免反复冻融导致酶活性下降。
不同细胞类型对胰酶消化时间及浓度需求存在差异，建议通过预实验确定最佳消化条件，避免过度消化导致细胞损伤。
使用前请仔细阅读产品技术资料，并按照相关实验规范进行操作。
