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  • MG101 MG102 重组蛋白A磁珠
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    重组蛋白A磁珠(rProtein A Magnetic Beads) 本产品将重组Protein A高密度氨基偶联到磁性琼脂糖微球表面,具有高载量,高特异性,高回收率和低非特异吸附的特性。可结合293/CHO细胞培养上清、杂交瘤细胞上清、小鼠腹水和血清等样本中的IgG或带有FC标签的重组蛋白。重组Protein A只保留了E,D,A,B,C五个抗体特异结合的结构域,降低了非特异性吸附,因此通过一步结合和洗脱即可得到纯度大于90%的目的蛋白。

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商品参数
    产品简介

    重组蛋白A磁珠(rProtein A Magnetic Beads) 本产品将重组Protein A高密度氨基偶联到磁性琼脂糖微球表面,具有高载量,高特异性,高回收率和低非特异吸附的特性。可结合293/CHO细胞培养上清、杂交瘤细胞上清、小鼠腹水和血清等样本中的IgG或带有FC标签的重组蛋白。重组Protein A只保留了E,D,A,B,C五个抗体特异结合的结构域,降低了非特异性吸附,因此通过一步结合和洗脱即可得到纯度大于90%的目的蛋白。


    产品介绍


    磁珠的参数和指标见Table 1,试剂和规格见 Table 2。


    Table 1:rProtein A Magnetic Beads 参数和性能指标

     

    磁珠密度

    0.95-1.05 g/mL纯磁珠

    磁珠浓度

    380-580个/mg纯磁珠

    磁响应速度

    ≤ 45 s

    粒径

    20-80um

    rProtein A偶联方式

    氨基偶联

    载量

    hIgG≥40 mg/ml(100%磁珠)

    保存缓冲液

    20%乙醇

    保存温度

    2-8℃


    Table 2:试剂和规格

     

    产品名称

    试剂名称

    规格

    数量

    保存条件

    rProtein A Magnetic   Beads

    10% v/v磁珠

    10ml

    1

    2-8℃

    10% v/v磁珠

    50ml

    1

    2-8℃

    使用须知

    本产品须与磁性分离设备配套使用

    磁珠使用前要混合震荡均匀

    磁珠预处理要充分

    孵育时要保持磁珠处于悬浮状态,以保持最大结合效率

    在使用及保存磁珠过程中,禁止磁珠长时间干燥

    禁止冷冻,离心磁珠,防止对磁珠产生不可逆的损伤

    建议磁珠仅重复纯化同种蛋白

    应避免磁珠因磁吸不完全导致的磁珠损耗

    用后及时再生,避免将磁珠长时间置于低pH的缓冲液中,避免磁珠长菌



    使用方法



    Ø  样品预处理(以纯化1ml小鼠腹水为例,目标抗体约1-2mg)

    用Wash Buffer将小鼠腹水稀释3-5倍。(杂交瘤细胞培养上清可使用Wash Buffer调节pH至7.0-8.0。)

    Ø  磁珠预处理

    颠倒混匀磁珠,吸取2mL 10%(v/v)磁珠于准备好的5ml EP管内,

    放置在磁力架上,静置1min,吸弃上清;

    加入与10%磁珠等体积的Wash Buffer 2ml(这里的等体积是指磁珠加保存液的总体积),取下EP管,颠倒混匀1min;

    放置在磁力架上,静置1min,吸弃上清;

    重复1次。

    Ø  结合

    将1ml小鼠腹水(pH7.0-8.0)用Wash Buffer稀释3倍至4ml,加入至装有磁珠的EP管中,颠倒混匀,室温缓慢旋转孵育1h(具体时间可根据结合效果调整)。

    Ø  洗涤

    将装有磁珠跟样本的EP管放置在磁力架上,静置1min,吸弃上清,加入与磁珠等体积的Wash Buffer(2ml),颠倒混匀1min,静置在磁力架1min,吸弃上清;

    重复5次。

    Ø  洗脱

    加入3-5倍磁珠体积(2ml 10% v/v磁珠的磁珠体积是200ul)的Elution Buffer(600ul),室温缓慢旋转洗脱10min;

    静置在磁力架上,吸走上清,得到洗脱1;

    再加入3-5倍磁珠体积(2ml 10% v/v磁珠的磁珠体积是200ul)的Elution Buffer(600ul),室温缓慢旋转洗脱10min;

    静置在磁力架上,吸走上清,得到洗脱2;

    向洗脱的上清中加入1/10 Elution Buffer体积的Neutralization Buffer(60ul)。

    分别测洗脱1和洗脱2的浓度,根据需要的抗体浓度决定是否混合。

    Ø  磁珠再生(以再生2ml 10%v/v磁珠为例)

    (1)将磁珠置于磁力架上,吸弃上清,向EP管内加入与10%磁珠等体积的Elution Buffer(2ml),室温缓慢旋转5min,静置在磁力架上,吸弃上清;

    (2)向EP管内加入与10%磁珠等体积的Wash Buffer(2ml),再加入1%(v/v)TritionX-100,室温缓慢旋转10min,静置在磁力架上,吸弃上清;

    (3)向EP管内加入与10%磁珠等体积的Wash Buffer(2ml),室温缓慢旋转2min,静置在磁力架上,吸弃上清,重复一次;

    (4)向EP管内加入1.8ml 20%乙醇,使磁珠的浓度保持在10% (v/v) ,4℃保存。


    订购信息


    产品名称

    规格

    货号

    rProtein A Magnetic Beads

    10ml, 10%(v/v)

    MG101

    rProtein A Magnetic Beads

    50ml, 10%(v/v)

    MG102

    rProtein G Magnetic Beads

    10ml, 10%(v/v)

    MG201

    rProtein G Magnetic Beads

    50ml, 10%(v/v)

    MG202

    Ni NTA Magnetic Beads

    10ml, 10%(v/v)

    MG301

    Ni NTA Magnetic Beads

    50ml, 10%(v/v)

    MG302

    Ni TED  Magnetic Beads

    10ml, 10%(v/v)

    MG401

    Ni TED  Magnetic Beads

    50ml, 10%(v/v)

    MG402



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