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世界首次,知禾突破单次构建千亿级(10^11)库容噬菌体展示Fab库,引领抗体发现的新时代!

1、 噬菌体展示抗体库的概述

噬菌体展示技术是一种高效基因表达筛选技术,将不同的外源基因分别插入噬菌体载体中, 随着噬菌体的传代,外源蛋白会展现在噬菌体表面,形成噬菌体文库。展示在噬菌体表面的蛋白保持了相对独立的空间构象和生物活性,有利于靶分子的特异性识别及结合,从而实现基因型和表达型的统一。随后用特定蛋白对噬菌体文库进行筛选,便 可快速的得到与该蛋白具有高度亲和力的抗体。筛选出的抗体可以进一步用于生物学功能研究。

1985年Smith利用基因工程,将外源基因插入丝状噬菌体的基因组,使目的基因编码的多肽以融合蛋白的形式展示,从而创建了噬菌体展示技术。

1990年,Mc Cafferty等利用噬菌体展示技术构建了库容为10^6的抗体库,使其成为一种新兴的抗体制备技术。

2018年,Frances Arnold、George Smith、Gregory Winter三人获得了诺贝尔化学奖。Winter是第一个利用噬菌体展示技术将鼠源抗体药物人源化,使得抗体药物用于临床治疗。

2023年,知禾实现单次构建千亿级(10^11)的库容噬菌体展示Fab库的技术突破。



噬菌体展示技术原理图


2、 单次构建千亿级噬菌体展示Fab库的挑战

构建千亿级噬菌体展示Fab库是一项艰巨的任务。首先,需要克服噬菌体展示技术在库容方面的限制。过去,Fab噬菌体展示库的容量往往只有十亿级。而现在,知禾成功地实现了单次构建千亿级(10^11)库容的突破,这是抗体发现领域的一项重大创举。

其次,构建如此庞大的噬菌体展示Fab库需要解决大规模克隆的技术挑战。知禾借助先进的基因工程技术,成功实现了高效的大规模克隆,为构建千亿级噬菌体展示Fab库奠定了坚实的基础。

最后,构建千亿级噬菌体展示Fab库需要解决数据管理和分析的难题。庞大的数据量需要高效的处理和分析,以便从中挖掘出有价值的抗体候选物。知禾利用先进的数据分析技术和人工智能算法,有效地管理和分析了千亿级噬菌体展示Fab库的数据,为抗体发现提供了有力支持。

3 、知禾突破的技术或方法

知禾收集100份健康人的PBMC,采用特色的无缝连接技术,配合高效的建库方案,我们一个批次电转就构建了库容大于10^11的噬菌体展示全人源Fab库。

  1. 建库特色:单次建库库容超过10^11, Kappa和Lambda分别建库;

  2. 高效的克隆技术:知禾采用了特色的无缝连接技术,快速高效地实现抗体克隆,连接产物达到mg级,连接效率大于85%,抗体阳性率100%,并且抗体序列中无冗余氨基酸;

  3. 高效的电击感受态和电转方案:知禾优化了电击感受态的制作工艺,使得单支电击感受态的电转效率达到千亿级,配合知禾特色的电转方案,这次我们电转了70支感受态,库容就达到了10^11。


4 、突破千亿级噬菌体展示Fab库的意义和应用前景

突破千亿级库容噬菌体展示Fab库是一项具有重大意义的技术突破。

传统的噬菌体展示技术由于在库容方面存在限制,通常只能构建十亿级别的库容,只有通过不断累计电转才能完成超大文库的构建。这样的累计大库筛选时十分不便,需要投入大量的噬菌体,反复淘选才能完成筛选,筛选后会往往会出现大量的重复克隆,这就大大增加了鉴定的难度,也降低了筛选到难筛靶点的概率。

而现在,知禾成功地实现了单次构建千亿级(10^11)库容的突破,极大的简化了超大库的筛选,加速了抗体发现。

这一突破意味着我们能够拥有构建更大规模的噬菌体展示Fab库的能力,更大的库容包含了更多的抗体候选物,这将大大提高抗体发现的效率和成功率,为药物研发和治疗疾病提供更多可能性。我们能够更全面、更快速地筛选和鉴定潜在的抗体候选物,为新药研发提供强大的支持。

千亿级库容噬菌体展示Fab库的应用前景也非常广阔。它可以被用于发现新型的抗体药物,用于治疗癌症、自身免疫性疾病、传染病等多种疾病。此外,它还可以应用于抗体工程、疫苗研发、生物传感器等领域,为生命科学和医疗领域的进展做出重要贡献。


知禾简介

知禾泰克,是北京知禾新创生物技术有限公司的品牌,专注于CGT行业,为客户提供值得信赖的、高质量、无动物源重组蛋白产品。作为通化安睿特生物制药股份有限公司的子公司,知禾秉持工匠精神,追求卓越的产品质量。

我们依托强大的技术实力和严谨的生产流程,确保每一件产品都能达到行业顶尖标准,为客户带来超越期待的品质体验。

在抗体工程领域,知禾团队拥有长达25年的丰富经验,曾持续且不间断地承担着国家“863”计划的抗体工程任务,是中国基因工程抗体领域的先驱者和奠基人。凭借这一深厚背景,我们为客户提供专业、高效、精准的抗体发现服务,帮助客户在抗体研究方面取得突破。

作为一家以工匠精神为基石的企业,知禾始终坚守品质至上的原则,以匠心雕琢每一款产品,用专业铸就卓越品质。

我们热切期待与您携手并进,共创辉煌明天,共同推动CGT行业的发展,为人类健康事业贡献更多力量。