背景信息
知禾泰克无血清细胞冻存液（货号CF1001）是一款专为科研工作者研发的高效、安全型细胞保存试剂。该产品采用先进的无血清配方，成分明确且不含任何动物源蛋白，从源头上有效降低了病毒、支原体等外源性污染的风险，保证了批次间的稳定性。
作为一款即用型冻存液，它无需繁琐的程序降温步骤，可直接将分装好的细胞置于-80℃超低温冰箱中冷冻保存，次日即可转移至液氮罐进行长期存储。其内含的双重保护成分能有效抑制冰晶形成，极大程度地保障了细胞在复苏后的高存活率与良好的生长状态，是各类哺乳动物细胞系及原代细胞冻存的理想选择。
产品特色
1.无血清，无动物源蛋白，有效避免病毒和支原体污染。
2.使用方便，冻存前无需程序降温。
3.兼容-80度冰箱和液氮冻存。
4.兼容孔板（如96孔板、48孔板）和冻存管冻存。
产品质量：冻存周期长，细胞存活率高
产品应用
1.96孔板大规模快速微量冻存杂交瘤细胞株候选克隆
2.无血清冻存293和CHO稳定细胞株
3.常规冻存传代细胞系
使用方法
一、常规细胞冷冻保存方法【细胞冻存管法】
选择冻存处于对数生长期的细胞有助于提高复苏细胞存活率。
1.按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞，置于离心管中，细胞计数
2.离心收集培养细胞（参考离心条件：1,000~2,000 rpm，RT, 3~5 min）
3.于离心管中加入适量的无血清细胞冻存液，使细胞浓度为5×105至5×10^6 cells/ml。缓慢地混合均匀，制成细胞混合液。
4.将细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。
5.直接将含细胞混合液的冻存管放入-80℃冰箱，长期冷冻保存。
6.若研究者需要液氮保存时，可将完全冻结的冻存管（放入-80℃冰箱后至少一昼夜）移至-196℃液氮罐。
二、冻存细胞复苏方法【细胞冻存管法】
1.从冰箱里取出细胞冷冻保存管，立即放入37℃振动水浴槽中快速解冻。
2.待细胞混合液完全融化后，立即加入1 ml细胞培养基与细胞混合，再将细胞混合液移入含有4倍体积细胞培养基的离心管中，混合均匀。
3.离心收集培养细胞（参考离心条件：1,000~2,000 rpm，RT, 3~5 min），充分弃除离心上清。
4.加入适量的新鲜细胞培养基，进行混合和稀释。
5.镜检后，研究者可根据各自方法和需要，调整细胞密度，进行细胞培养。
三、原位冻存法【孔板冻存法】
对于贴壁细胞：
1. 孔板中细胞生长状态良好且汇合度达到50%以上时，从细胞培养板中将培养基上清小心吸取干净。
2. 加入适量（体积根据孔板定，一般96孔板加100 ul, 48孔板加200 ul）无血清细胞冻存液于培养孔板中，充分浸润细胞。
3. 盖上盖板，做好密封措施，防止染菌。
4. 直接将含冻存液的细胞培养板放入-80℃冰箱，长期冷冻保存。
对于悬浮细胞：
1. 孔板中细胞生长状态良好且密度达到5×10^5至5×10^6 cells/ml时，用水平离心机离心（参考离心条件：1,000~2,000 rpm，RT, 3~5 min），从细胞培养板中将培养基上清小心吸取干净。
2. 加入适量（体积根据孔板定，一般96孔板加100 ul, 48孔板加200 ul）无血清细胞冻存液于培养孔板中，充分浸润细胞。
3. 盖上盖板，做好密封措施，防止染菌。
4. 直接将含冻存液的细胞培养板放入-80℃冰箱，长期冷冻保存。
四、原位冻存复苏方法【孔板冻存法】
对于贴壁细胞：
1.从冰箱里取出冷冻的细胞培养板，立即放入37℃培养箱中解冻。
2.待细胞冻存液完全融化后，将液体小心吸取干净，立即加入适量细胞培养基。
3.置37℃，5%CO2培养箱常规传代培养。
对于悬浮细胞：
1.从冰箱里取出冷冻的细胞培养板，立即放入37℃培养箱中解冻。
2.待细胞冻存液完全融化后，用水平离心机离心（参考离心条件：1,000~2,000 rpm，RT, 3~5 min），将液体小心吸取干净，立即加入适量细胞培养基重悬细胞。
3.置37℃，5%CO2培养箱常规传代培养。
产品保存
1.质量保障期从产品的生产日期起，为期1年。
2.短期保存于2-8℃，长期保存于-20℃。
3.为避免反复冻融影响产品性能，大包装产品推荐分装后，存放于-20℃备用。
产品优势
无血清，无外源蛋白，成分明确
即用型，无需自制稀释
无动物源，无血源性病毒风险
优化配方，高复苏率与细胞活性重现
注意事项
本产品仅供科研、工艺开发及生物制造用途使用，不得用于人体或动物的诊断、治疗或临床应用。
已添加 DMSO 等细胞保护成分，无需额外稀释或添加血清。
使用前充分预冷冻存液，细胞冻存操作应在冰上完成以降低 DMSO 常温细胞毒性。
冻存细胞应处于对数生长期且活性 >90%，方可获得最佳复苏效果。
复苏后使用预温培养基快速稀释冻存液，缩短细胞在冻存液中的接触时间。
不同细胞类型对冻存密度及解冻后处理方式的需求存在差异，建议通过预实验确定最佳冻存方案。
使用前请仔细阅读产品技术资料，并按照相关实验规范进行操作。
