背景信息
SUMO 蛋白酶也被称为 Ulp1（RP1002)，是酿酒酵母中ULP1(Ubl特异性蛋白酶1)的重组片段，为一种高活性半胱氨酸蛋白酶。与普通蛋白酶识别一级结构氨基酸序列不同，SUMO蛋白酶识别泛素样蛋白SUMO的三级结构，可以高度特异性地将重组融合蛋白中的 SUMO标签切除。SUMO 蛋白酶在很宽的温度(4℃~30℃)和pH(pH 7.0~9.0)范围内都具有活性，其中最佳催化温度为30℃。本产品为大肠杆菌表达的重组SUMO 蛋白酶，带有 His 标签，在融合蛋白切割后，可利用镍柱亲和层析轻松将其去除。
技术指标
参数项 | 规格/描述 |
产品名称 | SUMO 蛋白酶 (Ulp1/SUMO Protease/Ulp1 peptidase) |
来源 | 大肠杆菌重组表达 |
货号 | RP1002 |
产品形态 | 液体 |
酶活 | 2 U/µL |
标签 | His tag |
分子量 | ~27.8 kDa |
储存条件 | -20~-80°C |
10 × SUMO Protease Buffer | 500 mM Tris-HCl,pH 8.0,2% Igepal (NP-40),1.5 M NaCl,10 mM DTT (需自配) |
活性定义 | 在 1× SUMO Protease Buffer 中，30°C 反应 1 h，剪切 >85% 的 2 μg 底物所需要的酶量定义为一个活性单位 |
质量控制 | SUMO 蛋白酶的单条带纯度大于 85%，没有非特异性蛋白酶污染；经功能检测，不存在任何非特异性蛋白酶活性 |
应用 | 从重组蛋白中去除融合标签 |
使用方法
1. 直接将蛋白酶添加到纯化好的待切割蛋白溶液中，推荐使用比例：1mg待切割蛋白添加20 U Ulp1；推荐反应条件：4℃，过夜酶切；
2. 用户可以根据所研究的蛋白探索使用条件，可以在30℃，固定酶添加量20 U/mg，探究酶切时间1-6 h；或在4℃，固定过夜酶切时间，探究酶添加量10-40 U/mg；
3. 反应完成后，可取少量酶切产物进行 SDS-PAGE 分析，酶切后体系中的 SUMO 蛋白酶可通过IMAC树脂亲和层析去除。
运输与储存
冰袋运输。
产品应于 -20℃ 及以下条件下避光、密闭保存。建议分装后于 -20℃ 保存，避免反复冻融。
应用领域
Sumo蛋白酶（ULP1）是源于酿酒酵母的泛素样特异性蛋白酶，可高特异性识别 SUMO（Small Ubiquitin-like Modifier）蛋白三级结构并在其 C 末端精确切割，实现标签切除且无额外氨基酸残留。
广泛应用于：
重组蛋白 SUMO 标签切除
蛋白纯化工艺开发
蛋白结晶与结构生物学研究
蛋白-蛋白相互作用研究
目的蛋白天然 N 端的恢复
ULP1 高特异性的三维结构识别机制显著降低了偏离切割风险，广泛适用于 SUMO 融合蛋白表达体系的标签去除。相比线性序列识别蛋白酶（如 TEV、Thrombin），ULP1 在精确性、效率及通用性方面具备明显优势。
注意事项
1. 为达到最好的酶切效果，请保证样本为部分或完全纯化的蛋白；
2. 反应体系中咪唑的浓度应低于 150 mM，否则 SUMO 蛋白酶的活性会受到抑制；
3. SUMO 蛋白酶的理想反应液中 NaCl 的浓度为 150mM。不过根据实际情况，可在 100mM~300mM 之间调节 NaCl 的浓度以达到最佳的效果；
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；
5. 本产品仅限科研使用。
