磁珠的参数和指标见Table 1,产品规格见 Table 2。
Table 1:肝素磁珠参数和性能指标 基质
琼脂糖
粒径
10-37μm
载量
≥2mg/mL(磁珠纯体积)
磁珠浓度
20%(v/v)
储存温度
2-8℃
保存液
20% (v/v) 乙醇
保质期
2年
Table 2:产品规格
产品名称
货号
磁珠浓度
规格
肝素磁珠
MG901
20% v/v磁珠
5ml
MG902
20% v/v磁珠
50ml
注意:肝素磁珠,2-8℃ 保存,不要冷冻,禁止磁珠在储存和使用过程中变干。
使用须知 本产品须与磁性分离器配套使用
磁珠使用前要混合震荡均匀
磁珠预处理要充分
孵育时要保持磁珠处于悬浮状态,以保持最大结合效率
在使用及保存磁珠过程中,禁止磁珠长时间干燥
禁止冷冻,离心磁珠,防止对磁珠产生不可逆的损伤
建议磁珠仅重复纯化同种蛋白
应避免磁珠因磁吸不完全导致的磁珠损耗
用后及时再生,避免将磁珠长时间置于低pH的缓冲液中,避免磁珠长菌
应用场景 适用于从血浆中一步捕获到目的蛋白,配备磁力架或者知禾泰克PP系列高通量自动化蛋白纯化工作站可同时处理1-96 个样本。
使用方法 实验前准备 推荐缓冲液
Binding/ Wash Buffer
50 mM Tris-HCl, pH 8.0
Elution Buffer
50 mM Tris-HCl, 1M NaCl, pH 8.0
操作步骤 样品处理 (以人血浆中抗凝血酶Ⅲ的纯化为例)
取人血浆1mL 加入至1.5mL EP 管中,接着加入500μL Binding Buffer,充分混匀
磁珠预处理 充分混匀磁珠,取1mL 磁珠悬液置于1.5mL EP 管中,磁吸去上清;用1mL 结合/清洗液清洗2-3 次即可用于后续蛋白纯化。
结合 在步骤4.2 预处理的磁珠管中加入处理的样品溶液,在室温下震荡混匀15-30mins,使样品和磁珠充分接触并吸附,然后进行磁性分离,移弃上清液
漂洗 在上述分离得到的磁珠中加入1mL 结合/清洗液,充分混匀磁珠,磁性分离弃上清。重复该操作3 次。
洗脱 在上述完成磁珠洗涤的EP 管中加入200μL 洗脱液,移液器吹打或者涡旋振荡混匀,然后在室温下将EP 管置于混合仪混匀10-15mins 后进行磁性分离,收集上清液至新的EP 管。
磁珠保存和再生 向EP 管中加入1mL 纯化水,漩涡振荡重悬后进行磁性分离,移弃上清, 重复操作3 次;接着改用结合/清洗液洗涤磁珠3 次;最后加入1mL 储存液重悬磁珠,置于2~8℃保存。